定制各类格氏试剂

问题：关于分离问题
类型：求助 (悬赏分:3分)
提问：zhang707
等级：▲
版块：基本操作、分离技术(qixie,wanghong,)
信誉：17%
回复：2
阅读：844
时间：2006-08-24 19:24:42 编辑加入/取消收藏订制/取消短消息举报该贴

大家好:
我在分离一个样品的时候,薄层显示有两个点;用石油醚:乙酸乙酯=50:1展开,两个点的Rf值分别为0.55,0.87;觉得这样过柱子的话,两个会全冲下来不能得到分离;我又把极性调低,用石油醚:乙酸乙酯=60:1;80:1;100:1,结果发现两个点之间的距离变近Rf值相差0.1左右,请问大家要过柱子的时候应该选用什么内径的柱子和洗脱剂或者说怎样能把它们分离开来?
谢谢!!!

回复人：沧海一声笑,★★★ (为国家富强奋斗，为人民疾苦呐喊！) 时间：2006-08-24 20:12:50 编辑

1楼

不知道楼主知不知道那两个东西的结构，如果有酸性或者碱性基团，可以在薄层展开剂里适当加一点三乙胺或冰醋酸。

如果以上的方法不能采用，过柱子就用内径细一些的（个人认为越细越好），柱子的填料要多填（也就是说柱子要长）。

如果您的产品分子量相差悬殊，可以用葡聚糖，按分子量大小分离（大的先洗脱）。

回复人：linday,▲ (初学者) 时间：2006-08-29 10:35:17 编辑	2楼
我建议你用梯度淋洗的方法过柱子，从100：1开始，每次根据你上样多少选择展开剂的多少，比如50ml一次，接着就可以用90：1的50ml一直冲洗到60：1。中间要注意柱子的温度，因为展开剂很容易受温度的影响而变化，变的不是你要的极性了。

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