问题：求助柱层分离
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时间：2005-04-14 21:53:40 编辑加入/取消收藏订制/取消短消息举报该贴

有没有可能点板没出来的点

在柱分离产物中出现了

我就出现这种现象了导师说我掉东西进去了
可我发誓我看的时候真的没掉进去

回复人：ltwcj,▲▲ (快乐生活！！！) 时间：2005-04-15 02:22:07 编辑	1楼
有可能. 有可能两种产物的极性相差很小,没有被你发现而已.你可以准备一块较长的硅胶板,点板后进行多次(3次)以上展开,即溶剂前沿爬到板的最上端时,取出吹干,再放到展缸2次展开,类推.如果多次展开之后仍为一个点,那恐怕就可以推断是你人为地引进杂质了.

回复人：llaman,▲ () 时间：2005-04-15 23:19:38 编辑	2楼
也有可能是你在点板的时候，样品浓度比较稀，观察到的化合物不全导致的。可以将样品点的浓度稍高一些后，在比较一下。

回复人：isolated,▲ (从事天然药物化学和中药制剂工作) 时间：2005-04-16 09:18:04 编辑

3楼

这种情况是比较常见的，原因有以下几点：1、这种成分在样品中含量较低，在粗提物中，TLC上可能被其它大量的成分（主要矛盾）掩盖，这种成分相对的就成了微量成分（次要矛盾）；但是随着柱分离，它会富集在一个流分段中，在这一流分段中，这种成分就成了主要成分（主要矛盾），TLC时它就很明显。在做植化分离时，这种情况常见的。只要样品中有这种成分，柱分离应该能分出来，但在TLC上却不一定能显示。2、你的点样量少了，成分没显示。3你的点样量大了，而这个成分又和其它成分很相似，几个点Rf值很接近，由于点样量大，看起来是混在一起，成了一个点。如果是这种情况，点样量少一点可能会看到分开了。
个人的一点经验，仅供参考！

回复人：briskyang,▲▲▲ (毕生理想,近期计划,今日功课) 时间：2005-04-20 10:56:19 编辑	4楼
完全有可能,若想确证一下,HPLC分析一下就知道了!

回复人：fuhonge,▲ () 时间：2005-04-20 11:11:49 编辑	5楼
也有可能你的这个成分对紫外吸收或显色剂反应不是那么灵敏，只有高浓度的时候才能看到。

回复人：peptideSAR,▲ (没有权威，实验是检验学说的唯一标准！) 时间：2005-04-20 17:51:17 编辑	6楼
看你的东西的性质了，有的东西例如有些胺类，在过柱子的过程中会变掉而多出来几个点。

回复人：Tom,▲ (Pharma) 时间：2005-04-21 20:09:18 编辑	7楼
回复人：briskyang,▲▲ (不问收获,只问耕耘 ) 时间：2005-4-20 10:56:19 4楼完全有可能,若想确证一下,HPLC分析一下就知道了! 我发现的问题，HPLC检测含量100％，TLC跑出来还是有杂质斑点。浓度和仪器灵敏度的问题。建议跑大板，用不同型号的板跑。

回复人：jamesamimi,▲ () 时间：2005-04-22 11:01:07 编辑	8楼
还有一个可能就是你的产品在柱层析过程中有部分产品发生了分解，所以有可能出现过柱前薄层上没有出现的点。

回复人：Ilfruits,▲▲ () 时间：2005-04-27 21:59:17 编辑	9楼
楼上所说都有道理,要弄明白,最好HPLC分析一下.

回复人：briskyang,▲▲▲ (毕生理想,近期计划,今日功课) 时间：2005-04-28 18:59:54 编辑

10楼

回复人：Tom,▲ (化学爱好者 ) 时间：2005-4-21 20:09:18 7楼

HPLC的紫外检测器总是要比人眼睛在紫外灯下的检测灵敏度高很多，如果是一个稳定的物质，如果HPLC是100%，一般TLC是一个点。但要看到，这两种检测手段的机理并不一致，有些时候检测的结果也并不一致。如过这种物质较活泼，容易发生互变异构，容易和硅羟基发生反应，TLC显示的纯度不会高。我觉得，只要物质对溶剂稳定，HPLC的结果要可信。

回复人：拍蚊,▲ () 时间：2005-05-01 12:42:48 编辑	11楼
受教了!!谢谢

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