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问题:青霉素酰化酶如何保养?谢谢!
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提问:wangyuncha
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时间:2005-04-15 20:00:03  编辑    加入/取消收藏    订制/取消短消息    举报该贴    

青霉素酰化酶如何保养?谢谢!
回复人:henny1284, (药物化学) 时间:2005-04-16 14:27:15   编辑 1楼
青霉素酰化酶在酶促拆分中的应用 青霉素酰化酶(PA)在工业上被广泛地用于从青霉素制得6APA,以作为许多半合成β-内酰胺类抗生素的前体。近一时期,它所体现出的对苯乙酸基有高度选择性的特性,使其不仅能用于催化青霉素的水解,而且能用于催化其它的胺、多肽和醇的反应。Fuganti等[26]利用青霉素酰化酶对基质的对映选择性,对具双手性中心的苯乙酸乙酯的衍生物进行了水解,得到了(4R,5S)-醇,其ee为90%。
  γ-氨基丁酸(GABA)是一种重要的神经传递抑制剂,当人脑中GABA的浓度降至一个极限值时,脑溢血或一些神经性紊乱的疾病就会出现。而体内GABA的量是由GABA-氨基转氨酶(GABA-T)不可逆的失活而控制的。实验证明,GABA-T抑制剂的生物活性与其绝对构型有很大的关系。二丙烯基和乙烯基-γ-GABA的生物活性主要在(S)-对映体,而(R)-乙炔基-γ-GABA在体内的生物活性却高于消旋的与(S)-乙炔基-γ-GABA。Margolin[27]以青霉素酰化酶对苯乙酸的衍生物进行了拆分,体现出了很好的成效。
  具有光学活性的叔-亮氨酸(tert-Leu)是用于制备一系列抗艾滋病或抗癌药物的重要中间体。利用青霉素酰化酶对其衍生物的选择性还原胺化,即可得到所需的光学异构体。其中Hoechest等[28]将青霉素酰化酶固定在酚醛树脂上,完成了下列反应:




  而Turmer等[29]则通过另一中间体得到了(S)-Tle:
  Solodenko等[30]以青霉素酰化酶将与天然氨基酸极相似的具磷-碳键的胺基-烷基-磷酸盐的苯醋酸的衍生物进行立体选择性酶促拆分,使这一既可是酶的基质或抑制剂,又可是植物生长的调节剂或除莠剂的生物活性物质的生物活性得以充分显示。






  实验结果表明,反应时间从2 h到24 h,产率均为80%左右,而ee值为96%,说明青霉素酰化酶对该底物水解显示出了高度的立体选择性。





回复人:wangyuncha, (化工人员) 时间:2005-04-17 17:24:04   编辑 2楼
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回复人:hechengshi, (多年从事有机合成工艺摸索及进行中试,上生产的工作) 时间:2005-04-23 13:52:51   编辑 3楼
青霉素酰化酶因为其具有生物活性,因此在保养存放过程中有严格要求,首先要低温保存,其次每次使用完后要恢复其存活条件(PH值,温度范围等)。


回复人:ylmin000, (做一个能发挥个人价值的人!) 时间:2005-04-25 14:47:35   编辑 4楼
在冰箱内保存,要有不释放其活性的保护液,另外在使用的要控制一定的温度,ph值。


回复人:yanzr, () 时间:2005-12-19 10:40:04   编辑 5楼
游离酶与固定化酶,有时保存条件还有一些差别:
温度,如是固定化酶,有的需要0-4度,游离酶可冰冻;
对固定化酶,PH,可使用缓冲剂(需要注意缓冲成分和离子强度)
固定化酶还可能需要防腐剂,由于酶是蛋白质,应注意微生物的污染。





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