问题：请问各位做薄层色谱应注意什么
类型：求助 (悬赏分:3分)
提问：txt888txt
等级：▲
版块：有机化学问题(jimuwei,fpcwin1211,netpanda,yjgzfl,Ftian,)
信誉：100%
回复：19
阅读：3544
时间：2004-12-06 21:44:54 编辑加入/取消收藏订制/取消短消息举报该贴

我最近在做薄层色谱，但刚刚开始，希望得到各位高手的指点，尤其是展开剂的选择。谢谢！

回复人：Yan,★ (他山之石，可以攻玉) 时间：2004-12-06 21:58:30 编辑	1楼
(乙酸乙酯：石油醚)最常用的展开剂。可以尝试多个比例

回复人：yjgzfl,★ (研究) 时间：2004-12-08 14:56:28 编辑

2楼

本人作了近4年的合成，自己铺板分析。一些经验与你分享：
（1）如果自己铺制TLC板，注意选择用硅胶GF254，因为其中已经含有煅石膏和荧光添加剂，分别有利于粘合和分离后的显色；
（2）注意硅胶和0.5%羧甲基纤维素钠的配比，一般以15g:40mL为最好,我做过多次,还行!:-)
（3）展开时注意在展开时点样点不要低于展开剂，一般以距离一端1cm处点样为佳；展开后，溶剂前沿也最好不要到TLC板的最顶端，一般需留1cm左右；
（4）如果展开后有拖尾现象，可加少许的酸或碱调节即可（注意是少许，呵呵）；
（5）溶剂的极性也可参考别的书籍，进行配比调节极性。
（6）如果不能在三用紫外灯下显色，可放入碘缸或喷洒其他显色剂（具体可参考化学工业出版社出版的“平面色谱方法及应用”（何丽一）；

如有其他疑问，可再探讨！呵呵

回复人：yjgzfl,★ (研究) 时间：2004-12-08 14:58:13 编辑	3楼
还忘记一个问题了，展开后注意一定要将TLC板用电吹风吹干或者在红外下干燥，否则显色不清楚！

回复人：ycxfzf,▲ () 时间：2004-12-08 15:01:19 编辑	4楼
常用的展开剂：石油醚：乙酸乙酯。正已烷：乙酸乙酯。

回复人：txt888txt,▲ (为化学化工做点贡献) 时间：2004-12-08 18:57:38 编辑	5楼
谢谢几位，尤其是yjgzfl，你们给了我不少帮助。建议加分！

回复人：love418wh,▲ (专业是化学工程与工艺) 时间：2004-12-08 20:17:15 编辑	6楼
我们一般用乙醚，当然还有石油醚也可以。

回复人：admin,★ (论坛管理员-欢迎大家访问化学化工论坛) 时间：2004-12-08 21:46:25 编辑	7楼
接受答案了。

回复人：myroser,▲▲▲ (一个搞合成的人！) 时间：2005-02-05 10:57:48 编辑

8楼

薄层色谱法，系将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。
1.仪器与材料

(1) 玻板除另有规定外，用5cm×20cm，10cm×20cm或20cm×20cm的规格,要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。 (2) 固定相或载体最常用的有硅胶G、硅胶GF<[254]> 、硅胶H、硅胶HF<[254]>,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F<[254]>等。其颗粒大小,一般要求直径为10～40μm。薄层涂布,一般可分无粘合剂和含粘合剂两种;前者系将固定相直接涂布于玻璃板上, 后者系在固定相中加入一定量的粘合剂，一般常用10～15％煅石膏(CaSO4.2H2O在140℃烘4小时)，混匀后加水适量使用，或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.5～0.7％)适量调成糊状，均匀涂布于玻璃板上。也有含一定固定相或缓冲液的薄层。 (3) 涂布器应能使固定相或载体在玻璃板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。 (4) 点样器同纸色谱法项下。 (5) 展开室应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸，并有严密的盖子，除另有规定外，底部应平整光滑，应便于观察。

2.操作方法

(1) 薄层板制备除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后，倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2～0.3mm），取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下晾干，后在110℃烘30分钟，即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度（可通过透射光和反射光检视）。 (2) 点样除另有规定外，用点样器点样于薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边2.0cm，样点直径及点间距离同纸色谱法,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。 (3) 展开展开室如需预先用展开剂饱和，可在室中加入足够量的展开剂，并在壁上贴二条与室一样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封室顶的盖，使系统平衡或按正文规定操作。将点好样品的薄层板放入展开室的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5～1.0cm（切勿将样点浸入展开剂中）,密封室盖,待展开至规定距离(一般为10～15cm),取出薄层板，晾干，按各品种项下的规定检测。 (4) 如需用薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出，或直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量，则可用薄层扫描法。薄层扫描的方法，除另有规定外，可根据各种薄层扫描仪的结构特点及使用说明，结合具体情况，选择吸收法或荧光法，用双波长或单波长扫描。由于影响薄层扫描结果的因素很多，故应在保证供试品的斑点在一定浓度范围内呈线性的情况下，将供试品与对照品在同一块薄层上展开后扫描，进行比较并计算定量，以减少误差。各种供试品，只有得到分离度和重现性好的薄层色谱，才能获得满意的结果。

回复人：myroser,▲▲▲ (一个搞合成的人！) 时间：2005-02-05 10:58:53 编辑

9楼

铺板
铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。匀浆配比一般是硅胶G:水=1：2～3，硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。研磨匀浆的时间，根据经验来定，与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断，越稠越难下滴。匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量。涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不那么明显。通常，板的质量对薄层鉴别的影响不是很大，影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。

点样
尽量用小的点样管。如果有足够的耐性，最好只用1微升的点样管。这样，点的斑点较小，展开的色谱图分离度好，颜色分明。样品溶液的含水量越小越好，样品溶液含水量大，点样斑点扩散大。样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。点好样的薄层板用电吹风的热风吹干或放入干燥器里晾干。

展开剂配制
选择合适的量器把各组成溶剂移入分液漏斗，强烈振摇使混合液充分混匀，放置，如果分层，取用体积大的一层作为展开剂。绝对不应该把各组成溶液倒入展开缸，振摇展开缸来配制展开剂。混合不均匀和没有分液的展开剂，会造成层析的完全失败。各组成溶剂的比例准确度对不同的分析任务有不同的要求，尽量达到实验室仪器的最高精确度，比如：取1ml的溶剂，应使用1ml的单标移液管，移液管应符合计量认证要求，尽管多数时候这不是必须的。

展开系统的饱和
一般使用的是双槽的展开缸，一槽用来放展开剂，另一槽可加入氨水或硫酸。把待展开的板放入两槽间的平台，斜架着，盖上展开缸的盖子。让展开剂的蒸气充满展开缸，并使薄层板吸附蒸气达到饱和，防止边沿效应，饱和时间在半个小时左右。展开时难免要打开盖子把薄层板放入展开剂中，不过对薄层板与蒸气的吸附平衡影响不大，当然动作应该尽量轻、快。

温湿度的控制
温湿度对薄层影响都很大。不冻结的前提下，通常温度越低分离越好，较难的分离需在低温下分离，例如人参皂苷。湿度的影响，估计主要是影响薄层板的吸附能力，导致选择性（容量因子）的变化，湿度应根据实际情况确定。温度控制使用空调器或冰柜，湿度控制是通过在另一展开槽放置相应浓度的硫酸。

显色
喷显色剂显色最重要是有好的雾化器。

回复人：wstar72,▲ () 时间：2005-02-23 22:54:19 编辑	10楼
现在还用这种方法啊？？？？

回复人：zengyun,▲ (喜欢讨论) 时间：2005-07-07 13:37:11 编辑	11楼
我个人认为薄层色谱鉴别展开剂与温度、酸碱度有很大并联，因此要注意这一点。喷显色剂，有的反应特慢，加热或放置久一点。不知谁与我有共同的想法。呵呵！

回复人：tuoya,▲ (化学爱好者) 时间：2005-07-10 10:15:57 编辑	12楼
关于选择固定相和展开剂的问题，建议你先看看自己要分离的物质的极性，根据三角形法则（许多关于薄层分离中都会有该法则）来选择固定相和展开剂

回复人：dmttcd,▲ (化工新兵！) 时间：2005-07-11 15:54:25 编辑

13楼

一般来说，参照极性顺序选择展开剂是可行的；但是有时候要考虑到展开剂对于被展开物质的溶解度。这个我是从HPLC的谱图看来的。不同体系的流动相，对于同一个被展开物质可能有不同的结果，实际结果也是这样的。溶解度很小时，展开一般都是比较短，Rf小。HPLC结果就是保留时间很长，有时后大于10min。所以极性不是唯一的影响因素。我是这样认为的。

回复人：txt888txt,▲ (为化学化工做点贡献) 时间：2005-09-15 18:13:23 编辑	14楼
谢谢大家

回复人：1234gf,▲ (合成人员) 时间：2005-09-17 19:56:56 编辑	15楼
板子用电风吹会裂的直接先在炉子里用30摄氏度烘干在80度烘半小时就不裂了

回复人：shiwen,▲ (我很勤奋,但记性不大好.还好有些聪明.) 时间：2005-09-21 22:05:59 编辑	16楼
谢谢大家

回复人：月亮风,▲ (刚刚上路，请多关照！) 时间：2005-09-27 15:40:52 编辑	17楼
收益良多。

回复人：mfy88,▲ (123456789) 时间：2005-09-29 23:42:01 编辑	18楼
二楼的老大，有拖尾时什么时候用酸什么时候有碱，用什么酸什么碱（有机还是无机）

回复人：就是化学,▲ (化学的世界有我。我的世界有化学) 时间：2005-10-03 10:44:34 编辑	19楼
用电炉不怎么好,很容易把硅胶烤焦,用电吹风还好一点,不过要不停地移动

得分人：love418wh-1,Yan-1,ycxfzf-2,yjgzfl-4,

问题讨论没有结束...

您尚未进入本论坛,登录之后才可以回贴

7msec