问题：多糖过柱层析与苯酚硫酸法问题
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提问：精灵zzj
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时间：2010-07-09 21:26:25 编辑加入/取消收藏订制/取消短消息举报该贴

我在想用生物胶P2过柱多糖除盐，如果装50CM长1.6毫米宽的柱子，有谁知道有关的参数，提个建议。上样量是多少等。
文献上有说用苯酚硫酸法跟踪检测，哪些管子是多糖。具体要怎么做呢，这方法显色快吗。买的苯酚是晶体，结在一块了，要怎么配成溶液呢。哪位大侠教教我吧。
我的多糖是甘露糖醛酸

回复人：精灵zzj,▲ () 时间：2010-07-19 17:54:22 编辑	1楼
紫外怎样检测多糖，多糖有固定的吸收峰吗，洗脱液用什么好，水还是挥发性盐溶液

回复人：jimuwei,★★★ () 时间：2010-07-18 09:19:20 编辑	2楼
文献可能不准确，条件不一样，填充的柱子柱效也不一定一样。建议通过总结多篇文献后设定实验条件。苯酚在常温下世晶体的，可以用水溶解。

回复人：wentlee1,★ (制药工程，致力于化学与生物制药，熟悉GMP、工艺、设备、EHS、财务) 时间：2010-07-19 15:03:31 编辑

3楼

这个分子量差异较大，应该可以用比较高的上样量，柱效也不是主要问题，只要装柱的时候不出现问题就行了，凝胶的型号一定要选好（根据多糖的分子量），否则，盐分和多糖容易分不开
如果只是多糖和盐的话，还不如用紫外吸收+AgNO3，紫外用来找到多糖峰，AgNO3用来测定Cl-，PO43-也可以
苯酚一加热，在水中的溶解性好的很，常温溶解度不行

回复人：wentlee1,★ (制药工程，致力于化学与生物制药，熟悉GMP、工艺、设备、EHS、财务) 时间：2010-08-05 16:00:54 编辑

4楼

你可以用你的产品和杂质盐来做一个紫外吸收谱（只要不是很烂的紫外-可见分光光度计，都可以做波谱扫描的），然后根据两者吸收值差异最大的波长作为检测波长，样品浓度会有一定的影响，根据你的含盐量来，影响不大
紫外检测器有点贵，有条件的可以用。一般做层析的实验室都会配紫外检测器吧
柱子出来直接接紫外检测器，紫外检测器再连分布收集器。或者直接连电脑，跟HPLC有点像
洗脱液直接用纯化水就好了呀，除非凝胶型号不对

回复人：精灵zzj,▲ () 时间：2010-08-20 15:01:41 编辑	5楼
已经打分了！

得分人：jimuwei :1, wentlee1 :2,

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