问题：液相色谱中用保留值定性的方法
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版块：仪器分析、色谱解析()
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时间：2013-11-28 10:27:51 编辑加入/取消收藏订制/取消短消息举报该贴

　　与气相色谱相比，液相色谱的分离机理就复杂多了，不仅仅是吸附和分配，
还有离子交换、体积排除、亲核作用、疏水作用等。组分的保留行为也不仅只与
固定相有关，还与流动相的种类及组成有关(气相色谱中组分的保留行为只与固
定相种类和柱温有关，而与流动相种类无关)。因此液相色谱中影响保留值的因
素比气相色谱中要多很多。

　　在气相色谱中的一些保留值的规律在液相色谱中就不适用了，也不能直接用
保留指数(Kovats指数)定性。

　　在液相色谱中保留值定性的方法主要是用直接与已知标准物对照的方法。当
未知峰的保留值( t' R或V' R)与某一已知标准物完全相同时，则未知峰可能与
此已知标准物是同一物质，特别是在改变色谱柱或改变洗脱液的组成时，未知峰
的保留值与已知标准物的保留值仍能完全相同，则可以基本上认定未知峰与标准
物是同一物质。

　　在利用保留值数据进行比对和定性分析时要特别注意到：由于液相色谱柱的
填柱技术较复杂，液相色谱所使用的色谱柱的重现性目前还很不理想，即使是同
一批号的柱子，重现性也不一致，这就使得使用保留值数据进行分析受到限制。
因此，目前保留值数据只能作为定性分析的参考。可以根据这些数据和对样品的
了解来选用已知标准物，再用这些已知标准物与未知物在同一色谱条件下直接进
行对比。

　　最简单的保留值定性方法是将已知标准物质加到样品中去，若使某一峰增
高，而且在改变色谱柱或洗脱液的组成后，仍能使这个峰增高，则可基本认定这
个峰所代表的组分与已知标准物质为同一物质。

　　目前一些HPLC仪器配备了三维图谱检测器，如二极管阵列检测器，在进行未
知组分与已知标准物质比对时，除了比较保留时间外，还可以比较两个峰的立体
图形。如在使用二极管阵列检测器时，除了比较未知组分与已知标准物质的保留
时间外，还可比较两者的紫外光谱图，如果保留时间一样，两者的紫外光谱图也
完全一样，则可基本上认定两者是同一物质;若保留时间虽一样，但两者的紫外
光谱图有较大差别，则两者不是同一物质。这种利用三维图谱比较对照的方法大
大提高了保留值比较定性方法的准确性。美国Bio-Rad公司的血药分析仪
(Remeeli)就是依靠三维图谱的综合数据的分析来鉴别未知药物的。
内容来源：中国化工仪器网论坛http://club.chem17.com/bbs
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