问题：用硅胶柱层析分离的过程
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版块：仪器分析、色谱解析()
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时间：2005-06-26 16:23:21 编辑加入/取消收藏订制/取消短消息举报该贴

没用过硅胶柱层析　各位老大能简单的给我讲一下　还有我分离的是酮类的　谢谢拉

回复人：dba98039,▲ (天然药物的提取分离) 时间：2006-03-03 17:28:52 编辑	1楼
请问用过的硅胶能够重复使用吗？怎么处理啊？

回复人：haynehot,▲ (有机的新菜鸟) 时间：2006-03-04 02:05:07 编辑	2楼
能重复使用~先用极性大的溶剂（比如甲醇）冲柱子把柱子上的东西全冲下来。然后用石油醚等极性小的溶剂把柱子再冲一遍就可以了。但是分离的纯度完全没第一次装新柱的高。不过比较下的话我觉得还是重复使用比较好点。因为还可以重结晶嘛

回复人：dba98039,▲ (天然药物的提取分离) 时间：2006-03-04 12:58:17 编辑	3楼
那重复使用的硅胶,在上柱前是不是要活化啊?一般要多长时间呢?

回复人：haynehot,▲ (有机的新菜鸟) 时间：2006-03-04 21:27:50 编辑	4楼
这个我不清楚拉~我们单位就一直用石油醚冲柱子的。因为要分离的产品都是一样的。

回复人：micky,▲ (啦啦啦，我是一个小菜鸟) 时间：2005-06-26 17:04:47 编辑

5楼

1、先用薄层层析法选择合适的洗脱溶剂；一般要使所需点在rf0.2～0.3左右的比较好
2、装柱。可以湿柱，也可以干柱。不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次，因为溶剂和硅胶饱和时会放出热量有可能使产品分解。装完的柱子应该要适度的紧密（太密了淋洗剂走的太慢），一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）。柱子更忌讳的是开裂，甭管竖的还是横的，都会影响分离效果
3、上样。湿法省事，一般用淋洗剂溶解样品。
4、收集，检测，合并，蒸干。
呵呵，其实一下子很难说清楚的，你还是看看有机化学实验书吧，上面都有的。

回复人：botanic,▲ (植物成分提取分离鉴定) 时间：2005-07-19 17:09:45 编辑	6楼
我也想做柱层析呀，寻求个别指导帮助！email：hmxj2001@163.com

回复人：lingxiang,▲ () 时间：2005-07-26 18:04:01 编辑

7楼

你说的酮类是不是指黄酮类物质啊?如果是,那我建议你用聚酰胺色谱法。聚酰胺色谱法对黄酮类、酚类、醌类等物质的分离，要比其它方法优越，其特点是：对黄酮类物质的分离是可逆的，分离效率高，可分离性质极相近的类似化合物。方法简便、速度快、样品容量大，适于制备色谱。
至于硅胶柱层析的用法嘛，与各种柱层析法的使用方式差不多，只是洗脱液的选择不一样。你自己找有关这方面的书详细看看吧。

回复人：botanic,▲ (植物成分提取分离鉴定) 时间：2005-07-30 17:43:33 编辑	8楼
用氯仿从植物中提取的的稠膏状未知物质（成分、类别均不知道），如何进行分离鉴定呀！大家讨论一下！谢谢！

回复人：jaywoo,★ (搞有机合成,有苦也有乐!) 时间：2005-08-31 21:27:12 编辑	9楼
[补充]硅胶柱层析流出液监测:如果有紫外吸收就用,如果没有只能分段截取(一定体积),后用TLC检测出所需组分.

回复人：Philips,▲ (从事药物化学教学科研工作) 时间：2005-08-31 21:54:38 编辑	10楼
先用薄层摸条件吧！

回复人：jaywoo,★ (搞有机合成,有苦也有乐!) 时间：2005-08-31 22:22:58 编辑	11楼
试一试:氯仿/甲醇/水=5/2/3.

回复人：sany,▲ (银杏萜内酯的提取分离检测) 时间：2005-09-29 10:08:25 编辑	12楼
我现在在做银杏的提取分离检测,由于我不是做化学的,很多东西都不会,这边也没人做这个,很多时候一个人在实验室照着文献慢慢做,也不懂别人为什么这么做.很是郁闷啊!!!!!!!!每个人的方法都不一样,让我无所是从.各位有谁在做这方面工作的,盼望赐教!

回复人：mfy88,▲ (123456789) 时间：2005-10-10 08:19:02 编辑	13楼
过柱是靠经验啊

回复人：flychem,★ () 时间：2005-10-12 15:48:41 编辑

14楼

柱层析：

装柱子（添硅胶）时，有两种方法：即湿法装柱和干法装柱，二者各有优劣。不论

干法还是湿法，硅胶（固定相）的上表面一定要平整，并且硅胶（固定相）的高度一般

为15cm左右，太短了可能分离效果不好，太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不

好。

湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂

"走柱子"，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。

干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不

再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装

的很结实。接着是用淋洗剂"走柱子"，一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例

再稀释一倍后的溶剂。通常上面加压，下面再用油泵抽，这样可以加快速度。干法装柱

较方便，但最大的缺陷在于"走柱子"时，由于溶剂和硅胶之间的吸附放热（可以用手

摸柱子明显感觉到），容易产生气泡，这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚，二氯甲

烷更为明显。虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉，但是，一旦撤去压力，如在上

样、加溶剂等操作的时候，气泡就会释放出来，严重时，整个柱子变花，样品不可能平

整地通过，当然也就谈不上分离了。解决的办法是：第一、硅胶一定要天结实；第二、

一定要用较多的溶剂"走柱子"，一定要到柱子的下端不再发烫，恢复到室温后再撤去

压力。

也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂，防止添加溶剂的时候，使得样品层

不再整齐。但我的感觉是如果小心上样，添加溶剂，则没有这个必要。

上样也有干法和湿法之分：干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后，在加入

少量硅胶，拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻

烦，但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂（最好就是展开剂，如果展开

剂的溶解度不好，则可以用一极性较大的溶剂，但必须少量）将样品溶解后，再用胶头

滴管转移得到的溶液，沿着层析柱内壁均匀加入。然后用少量芗洗涤后，再加入。湿

法较方便，熟手一般采用此法。

上样完毕后，接着即用淋洗剂淋洗。淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例

再稀释一倍后的溶剂。由于层析柱和薄板的不同，即使两者使用的硅胶都相同，但是在

把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时，也显得极性偏大，所以要稀释一倍，但又不能稀

释太多，否则成了靠扩散作用来分离，效果也不会好。

回复人：sany,▲ (银杏萜内酯的提取分离检测) 时间：2005-10-24 14:43:40 编辑	15楼
该用什么样的柱子呢?我的实验室有Z型的层析柱,有1米长,但是我不知道该怎么用它.不是说装了柱子要活化的吗?那么长怎么放进干燥箱里活化呢?

回复人：flychem,★ () 时间：2005-10-27 11:02:49 编辑	16楼
根据你样品的多少选择柱子。柱子未必要活化吧？所谓的活化其实就是让硅胶干燥即可，如果你用的硅胶足够干燥就用不着活化。

回复人：壶壶,▲ () 时间：2007-12-05 09:58:00 编辑	17楼
铺在柱上端的那层石英砂需要经过预处理吗？如果需要，怎么处理？

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